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　　注意操作大鼠Elisa試劑盒事項(xiàng)與步驟

　　大鼠Elisa試劑盒注意事項(xiàng):

　　1. 大鼠Elisa試劑盒凍結(jié)與寄存：-20℃取出后主張放入2～8℃冰箱中凍結(jié)約，每隔一段時間悄悄搖晃均勻，不可直接放入溫度較高處凍結(jié)，防止因溫度改變太大，形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積，血清的質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶，主張無菌分裝,再放回冷凍，防止反復(fù)凍融。4℃長時間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白，形成絮狀物質(zhì)變差。

　　2. 大鼠Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng)，在極少數(shù)情況下(培育ES細(xì)胞，滑潤肌細(xì)胞時)主張滅活，在培育其余細(xì)胞時不主張滅活血清。血清滅活十分簡單產(chǎn)生沉積，如必須滅活請按56℃，30 min，輕微搖晃準(zhǔn)則操作，滅活溫度高、時間長、搖晃不均都簡單產(chǎn)生沉積。

　　3. 大鼠Elisa試劑盒培育基：無血清培育基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢，可是，血清仍然是培育液中最根本的添加物，尤其是在原代培育或細(xì)胞成長狀況不良時，常常會先使用有血清的培育液進(jìn)行培育，待細(xì)胞成長旺盛后再換成無血清培育液。

　　大鼠Elisa試劑盒操作過程 ：

　　1.用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭潔凈，不要用紗布;

　　2.將蓋玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每個平皿可放置2-3片);

　　3.在間隔紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

　　4.將通過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培育板中，使蓋玻片*浸在培育液中;

　　5.將人Elisa試劑盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞成長至覆蓋培育板底部2/3面積時，將培育板取出，用蓋片鑷悄悄取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

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